UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
DIRECCIÓN DE NIVELACIÓN Y ADMISIÓN
SISTEMA NACIONAL DE NIVELACION Y ADMISION
SEGUNDO SEMESTRE 2014
PRACTICA DE LABORATORIO DE BIOLOGIA #10
NOMBRE: Mauricio Cangas.
CURSO: Salud V01
DOCENTE: Bioq. Carlos García.
FECHA: 15/01/2015.
TEMA: Ácidos nucleicos.
OBJETIVO: Simular la formación del ADN.
MATERIALES SUSTANCIAS
Hígado de pollo HOH
Varilla de vidrio Cloruro de Sodio
Espátula Bicarbonato sódico
Batidora Detergente líquido o champú
Gasas Etanol frío
Vaso de precipitación.
Tubos de ensayo.
GRAFICOS:
PROCEDIMIENTO:
1. Primero se coloca 50 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar agua del grifo.
2. Luego se añade 1,5 g de sal de mesa y 5 g de bicarbonato sódico.
3. Se añade 5 ml de detergente líquido o champú.
4. Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN (de 15 a 20 g de hígado de pollo) y cortarla en cuadraditos.
5. Triturar la muestra con un poco de agua en la batidora accionando las cuchillas a impulsos de 10 segundos. Así se romperán muchas células y otras quedarán expuestas a la acción del detergente.
6. Mezclar en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampón frío y agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos. Separar después los restos vegetales más grandes del caldo molecular haciéndolo pasar por un colador lo más fino posible. Lo ideal es centrifugar a baja velocidad 5 minutos y después pipetear el sobrenadante.
7. Retirar 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y añadir con pipeta 10 ml de alcohol isoamílico enfriado a 0ºC. Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del recipiente, teniendo éste inclinado. El alcohol quedará flotando sobre el tampón.
8. Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separación entre el alcohol y el tampón. Remover la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN. Pasado un minuto retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedará adherido a su extremo con el aspecto de un copo de algodón mojado.
Observación:
El producto filamentoso obtenido de la extracción no es ADN puro ya que, entremezclado con él, hay fragmentos de ARN. Una extracción "profesional" se realiza añadiendo enzimas que fragmentan las moléculas de ARN e impiden que se unan al ADN.
Conclusión:
Concluyo diciendo que los electrolitos son muy buenos conductores de electricidad ya que en esta práctica pude darme cuenta de su efectividad al encender un foco con un electrolito.
Recomendaciones:
1. Utilizar mandil para que las soluciones que mezclemos no manchen nuestra vestimenta.
2. Tener cuidado al realizar la mezcla de las sustancias.
Preguntas.
¿Qué es el ADN?
El ácido desoxirribonucleico, abreviado como ADN, es un ácido nucleico que contiene instrucciones genéticas usadas en el desarrollo y funcionamiento de todos los organismos vivos conocidos y algunos virus, y es responsable de su transmisión hereditaria.
¿Qué es la cromatina?
La cromatina es el conjunto de ADN, histonas, proteínas no histónicas y ARN que se encuentran en el núcleo de las células eucariotas y que constituye el genoma de dichas células.
Bibliografía.
- Olaf A. Holguín, R. A. Ragatz. Reverte, 1982
Webgrafía.
http://www.profesorenlinea.cl/fisica/Materiayenergia.htm
Autoría:
Bioq. Carlos García.
.
Mauricio C.
Firma
PROCEDIMIENTO:
1. Primero se coloca 50 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar agua del grifo.
2. Luego se añade 1,5 g de sal de mesa y 5 g de bicarbonato sódico.
3. Se añade 5 ml de detergente líquido o champú.
4. Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN (de 15 a 20 g de hígado de pollo) y cortarla en cuadraditos.
5. Triturar la muestra con un poco de agua en la batidora accionando las cuchillas a impulsos de 10 segundos. Así se romperán muchas células y otras quedarán expuestas a la acción del detergente.
6. Mezclar en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampón frío y agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos. Separar después los restos vegetales más grandes del caldo molecular haciéndolo pasar por un colador lo más fino posible. Lo ideal es centrifugar a baja velocidad 5 minutos y después pipetear el sobrenadante.
7. Retirar 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y añadir con pipeta 10 ml de alcohol isoamílico enfriado a 0ºC. Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del recipiente, teniendo éste inclinado. El alcohol quedará flotando sobre el tampón.
8. Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separación entre el alcohol y el tampón. Remover la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN. Pasado un minuto retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedará adherido a su extremo con el aspecto de un copo de algodón mojado.
Observación:
El producto filamentoso obtenido de la extracción no es ADN puro ya que, entremezclado con él, hay fragmentos de ARN. Una extracción "profesional" se realiza añadiendo enzimas que fragmentan las moléculas de ARN e impiden que se unan al ADN.
Conclusión:
Concluyo diciendo que los electrolitos son muy buenos conductores de electricidad ya que en esta práctica pude darme cuenta de su efectividad al encender un foco con un electrolito.
Recomendaciones:
1. Utilizar mandil para que las soluciones que mezclemos no manchen nuestra vestimenta.
2. Tener cuidado al realizar la mezcla de las sustancias.
Preguntas.
¿Qué es el ADN?
El ácido desoxirribonucleico, abreviado como ADN, es un ácido nucleico que contiene instrucciones genéticas usadas en el desarrollo y funcionamiento de todos los organismos vivos conocidos y algunos virus, y es responsable de su transmisión hereditaria.
¿Qué es la cromatina?
La cromatina es el conjunto de ADN, histonas, proteínas no histónicas y ARN que se encuentran en el núcleo de las células eucariotas y que constituye el genoma de dichas células.
Bibliografía.
- Olaf A. Holguín, R. A. Ragatz. Reverte, 1982
Webgrafía.
http://www.profesorenlinea.cl/fisica/Materiayenergia.htm
Autoría:
Bioq. Carlos García.
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Mauricio C.
Firma
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